指定課題研究報告
成長ホルモンおよびIGF-I測定の標準化に関する研究
主任研究者 島津 章 (国立病院機構京都医療センター) 共同研究者 立花克彦 (日本ケミカルリサーチ) 勝又規行 (国立成育医療センター研究所) 肥塚直美 (東京女子医科大学第二内科) 横谷 進 (虎の門病院小児科) 顧 問 藤枝憲二 (旭川医科大学小児科) 田中敏章 (国立成育医療センター)
はじめに
成長ホルモン（GH)と関連因子であるインスリン様成長因子-1（IGF-1)の測定はGH分泌異常症の診断と治療に必須であり、視床下部・下垂体機能の指標の一つとしても用いられる。従来、放射性同位元素（RI）を用いたポリクローナル抗体による競合型免疫測定法（ラジオイムノアッセイ：RIA）であったが、モノクローナル抗体による捕捉抗体と標識抗体によるサンドイッチ型の非RI免疫測定法が主流となり、測定時間の短縮・検体量の少量化・測定感度にすぐれた全自動測定キットが数多く開発された。しかし、測定キットにより測定値のバラツキが問題となり、その対策として成長科学協会GH・関連因子測定検討専門委員会による測定値補正式の作成、リコンビナントGHの較正標品の導入による測定値の標準化が行われた。本研究では、GHおよびIGF-1測定の標準化を世界レベルに広めることを目的に、これまでの成長科学協会によるGH測定の標準化の過程を検証し、わが国における経験を世界に発信して国際的なGH測定の標準化を推進し、IGF-1測定の標準化に向けた基礎的な検討を行う。
成長科学協会のGH・関連因子測定検討専門委員会として、使用する測定キットによって診断やGH治療適応判定の結果が異なることを防ぐことを目的に、平成3年度以降、各測定キットによる測定値の相関を検討し補正式が作成された。平成10年度以降は市販されているすべての測定キットによる測定値の平均を従属変数として線形関係式を求め、それを補正式として採用した。測定キットによる測定値の違いは､そのほとんどが各キットの標準品が異なる較正標品に準拠していることに起因し、用いる標準品をリコンビナントGHに統一することによりほぼなくすことができることが明らかとなった。その結果、2005年4月から、各キットの標準品はリコンビナントGH、あるいはリコンビナントGHの較正標品（WHO 98/574）に準拠したGHを用いるように変更され、日本におけるGH測定値の標準化が可能となった。しかし、リコンビナントGHを標準品あるいは較正標品とした場合、測定値は従来の補正値の60%になり、診断の手引きなどにおいてリコンビナントGHを標準品とした場合の判定値の改訂が行われた。GH測定標準化後における測定キット間差の検討も重要な課題であり、市販されているGH測定キットを用いた健常者血液検体の集中測定を今後引き続き行う。
１．わが国におけるGH測定の標準化
GH測定標準化への国際的協調の必要性が以前から指摘されており、最近になりようやく動きだした。International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine（IFCC）の後援を受けて英国が主体となり、GH測定の標準化への第一歩として、GH測定値を質量単位で表示すること、標準品としてWHO標品IS 98/574を用いることのコンセンサス文書が2006年に公表された（Eur J Endocrinol 2006; 155: 1-2）。免疫学的測定に内在する抗体の違いによる活性の相違や測定誤差は避けて通れない問題であり、施設間差およびキット間差を検討する国際的な多施設共同研究が、ドイツのStrasburger教授らを中心に計画されている。わが国の成長科学協会による標準化の試みは世界でも注目を浴びており、日本からの情報発信が必須であり、共同実験へ標準測定施設として参画する。
２．国際的なGH測定標準化の動向
GH関連因子としてIGF-1測定を取り上げた。IGF-1測定の標準化には、GH以上に多くの問題点を抱えている。国際的な標準品であるWHO IRP 87/518はメチオニン残基が付いたリコンビナントIGF-1であり、その免疫学的活性は約半分と言われている。新しい国際標品が必須である。IGF-1測定の大きな問題点の一つにIGF結合蛋白の測定に対する干渉があげられる。総IGF-1活性は、結合蛋白から解離させて測定するが、結合蛋白を変性させたり、再結合を阻止する方法の厳密度が問題である。もう一つは、多数の健常人の検体を用いた基準範囲の設定が必要である。
３．IGF-1測定の標準化
現在、わが国のIGF-1測定キットを用いた相関関係を詳細に検討し始めている。日本人におけるIGF-1の年齢別基準範囲の再設定を行うべく、健常成人を対象として、各年代5歳刻み男女50例ずつの規模（総数1000例以上）で、予備的研究を開始した。年齢別基準範囲の設定にはスムージングした近似曲線を用いる方法を検討したい。測定法に依存しない表示としてSDスコアで表すことが求められている。