| 主任研究者 | 立花克彦 | （神奈川県立こども医療センター） |
| 共同研究者 | 勝又規行 | （国立小児病院） |
| 島津 章 | （国立京都病院） | |
| 對馬敏夫 | （東京女子医科大学内分泌センター） | |
| 肥塚直美 | （東京女子医科大学第二内科） | |
| 藤枝憲二 | （北海道大学小児科） | |
| 横谷 進 | （虎の門病院小児科） |
はじめに
成長ホルモン分泌不全（GHD）の診断は、現在のところ各種の成長ホルモン（GH）分泌刺激試験の際の血中GH濃度頂値によって行われている。血中GH濃度は、抗原抗体反応を利用して測定され、数種類の測定キットが市販されているが、その測定値は、用いる測定キットによってかなりの差がある。従って、同じ患者の同じ検体であっても、どの測定キットを用いて測定したかによってその測定値が異なり、その結果、診断が異なってしまう可能性がある。そのため、成長科学協会ではGH・関連因子測定検討専門委員会が、使用する測定キットによって診断やGH治療適応判定の結果が異なることを防ぐことを目的に、平成3年度以降、市販されている各測定キットによる測定値の補正式を作成してきた。一昨年度からは、この検討は指定研究として行われている。
我々は、本研究において現在市販されている5種の測定キットについて検討し、補正式を作成する共に、一昨年度は、キット添付の標準品ではなく、新に調整した共通の標準品を使用して検体を測定すれば、測定値がかなり一致することを示した。今年度は、昨年度、補正式を作成するときに行った測定結果を基に、新たな共通の標準品を使用した場合の測定値の相関を再検討した。
方法
健常成人10人を対象にGRH負荷を行い、血清を採取し-20℃で保存した。この血清検体のGH濃度を、現在市販されている5種のGH測定キット、即ち栄研化学immunoradiometric assay (IRMA)キット（AbビーズHGH"栄研"、以下栄研IRMA）、第一アイソトープ研究所IRMAキット（GHキット「第一」、以下第一IRMA）、東ソーimmunoenzymometric assay（IEMA）キット（Eテスト「TOSOH」U（HGH）、以下東ソーIEMA、日立化成chemiluminescence enzyme immunoassay (CLEIA)キット（ヒダザイムCL、以下日立化成CL）、ヤトロン CLEIAキット（イムライズhGH、以下ヤトロン・CL）を用いて測定した。同時に、国立衛生試験所ヒト成長ホルモン標準品を希釈して標準品とし、それを用いた場合の各々の測定キットによる測定値を求め、比較した。なお、国立衛生試験所ヒト成長ホルモン標準品はリコンビナント22Ｋヒト成長ホルモンである。
結果
各測定キット間の測定値の相関を図1に、国立衛生試験所標準品を用いて測定した場合の測定値の相関を図2に示した。国立衛生試験所標準品を標準として測定した場合、各キットによる測定値はほぼ一致した。
考案
GHDの場合、原則的にその診断よってGH治療の適応が決定されるため、用いる測定キットによって診断が変わることは望ましいことではない。そのため、成長科学協会では平成3年度以降、各測定キットによる測定値の相関を検討し、補正式を作成して用いることで、この問題を便宜的に解消するよう対処してきた。実際には、平成10年度以降は、すべての測定キットによる測定値の平均を従属変数として線形関係式を求め、それを補正式としている。この補正により、用いる測定キットによる診断の差はなくすことはできると思われる。しかし、これは時代をおっての不変の基準とはなりえず、過去と比較しての議論が不可能となる。また、測定キットによって同じ検体を測定しても大幅にその結果が異なるという事態は続いている。
現在、各測定キットの標準品はWHOの基準品を一次標品とし、それに対して各メーカーは二次標品を作成し、キット添付の標準品は二次標品に対して検定されている。しかし、同じWHO基準品といっても、全く同一のWHO基準品が用いられているわけではない。現在日本で市販されているGH測定キットで用いられている標準品は、2種のWHO基準品（66/217、80/505）に準拠している。これら二種の基準品はいずれも下垂体抽出品であるが、GH含有量に差がある。即ち、違うGH含有量の基準を用いているのであるから測定値が異なるのは当然のことといえる。本年度の検討で、国立衛生試験所ヒト成長ホルモン標準品を希釈したものを共通の標準品として用いると、同一検体の測定値は各測定キットによってほぼ一致した。即ち現在市販されているGH測定キット間の測定値の乖離の原因の（すべてではないにせよ）大部分は、この標準品の実際のGH含有量の違いに起因すると思われた。
現在ではGH含有量を正確に知ることのできるリコンビナントGHが入手可能であり、このことは時代を超えて同じ標準品を用意することを可能にする。現在WHOから供給されている基準品は、リコンビナントGHの88/624である。Growth hormone research societyの小児のGHDの診断と治療についての提言でも、88/624を基準として用い、モノクローナル抗体を用いた測定キットで測定することが推奨されている。
これらの結果をもとに、我々は、今後、各キットの一次標品・二次標品を、さらには実際のキットに添付する標準品をもリコンビナントGHにするのが望ましいと考え、各キットメーカーに対応を要請し、検討会を繰り返し行った。幸い、各キットメーカーとも積極的で、少なくとも一次・二次標品、そして可能な限り添付標準品もリコンビナントGHとする方向で一致を見た。しかし現実に標準品を変更するとなると、安定性の検討などなど、短時間では解決できない問題も多く、すぐに実現するには至っていない。今後、さらに各メーカーと協力して、測定値の乖離をなくす努力を続ける必要がある。又、今後の新規のGH測定キットについても、働きかけを行う必要がある。
リコンビナントGHを標準品として用いると、測定値はこれまでの測定値に比べてかなり低下する。そのため正常児でも負荷試験の際のGH頂値がかなり低値となることが最近指摘されている。GHDの診断のためのGH分泌刺激試験におけるGH頂値の10ng/ml、5ng/mlといったカットオフ値は、二抗体法RIAによる測定が行われていた時代に経験的に設定されたものである。従って、リコンビナントGHを標準品として用いた測定値をこれにそのままあてはめることはできない。診断の手引きや成長科学協会の治療適応判定基準を改訂するか、あるいは測定値を従来法の測定値に補正することも必要となるため、各方面の関係者との連携も必要である。
図1：市販成長ホルモン測定キットによる検体測定値の相関（附属標準品を用いた場合）
図2：市販成長ホルモン測定キットによる検体測定値の相関（国立衛生試験所標準品を用いた場合）
